EGFR（Epidermal Growth Factor Receptor）是上皮生长因子（EGF）细胞增殖和信号 传导的受体，EGFR 是一种糖蛋白，属于酪氨酸激酶型受体，位于细胞膜表面，靠与配体 结合来激活。EGFR 与肿瘤细胞的增殖、血管生成、肿瘤侵袭、转移及细胞凋亡的抑制有 关。EGFR 基因突变是预测 NSCLC 患者使用 EGFR-TKIs 疗效的重要靶标。

      EGFR 酪氨酸激酶区域的突变主要发生在 18-21 外显子，其中 19 号和 21 号外显子突 变覆盖突变的 90%。EGFR 突变主要包括 4 种类型：外显子 19 缺失突变、外显子 21 点突 变、外显子 18 点突变和外显子 20 插入突变。最常见的 EGFR 突变为外显子 19 缺失突变 和外显子 21 点突变，二者均会导致酪氨酸激酶结构域活化。EGFR 基因突变可以分为两大 类，一个是药物敏感突变，也就是突变后可以使用某种靶向药物（如 19 缺失，L858R 突 变），另一个是耐药突变，即突变后对某种靶向药物耐药（如 T790M 突变）。

      BaF3（小鼠原 B 细胞）的生长和增殖需要 IL-3 的维持。顺利获得引入各种表达激酶的基因， 能作为 BaF3 的驱动基因，让 BaF3 不再依赖 IL-3 而增殖，进而激酶基因成为 BaF3 增殖依 赖的驱动基因，用于评估小分子药物对激酶的靶向抑制作用，原理及流程见下图所示。
 

Figure 1. EGFR[Del19-T790M-C797S] BaF3 细胞的构建原理图

1. WB of EGFR Del19/T790M/C797S expression

Lane 1: Negative control
Lane 2: EGFR-Del19/T790M/C797S

Figure 2. WB of EGFR Expression
 

2.Sanger sequencing

Figure 3. EGFR Del19-T790M-C797S/BaF3  Del19

Figure 4. EGFR Del19-T790M-C797S/BaF3  T790M-C797S
 

3. Anti-proliferation assay

Figure 5. Recombinant EGFR Del19-T790M-C797S/BaF3 stably expressing EGFR.
 

Figure 6. CTG Proliferation Assay of EGFR [DEL19-T790M] C797S BaF3 (C2).